kamiya KT-354說(shuō)明書(shū)

大鼠微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
微量白蛋白的定量測(cè)定
在大鼠生物樣品中
貨號(hào)：KT-354

Rat Microalbumin ELISA

微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)大鼠
貨號(hào)KT-354
預(yù)期用途
大鼠微量白蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析方法，用于大鼠生物樣品中微量白蛋白的定量測(cè)定。僅供研究使用。
引言
白蛋白是一種多功能蛋白，通過(guò)血流動(dòng)力學(xué)、轉(zhuǎn)運(yùn)和營(yíng)養(yǎng)機(jī)制促進(jìn)體內(nèi)平衡。在所有哺乳動(dòng)物和許多低等脊椎動(dòng)物的血管內(nèi)和血管外都發(fā)現(xiàn)了白蛋白。它是由肝臟合成的約67000道爾頓的分子。通常只有極少量的白蛋白逃過(guò)腎小球的再吸收，并被排泄到尿液中。許多隱匿性疾病可導(dǎo)致腎臟損害，這可能導(dǎo)致過(guò)量的血清蛋白，包括白蛋白，被腎臟和尿排出。
該ELISA可用于測(cè)定血清、組織提取物和其他生物流體中的白蛋白。
原則
雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的原理如圖1所示。在本試驗(yàn)中，樣品中的白蛋白與已吸附到聚苯乙烯微滴定孔表面的抗-alb抗體反應(yīng)。清洗去除未結(jié)合蛋白后，加入與辣根過(guò)氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗-Album抗體。這種HRP結(jié)合抗體與先前結(jié)合的白蛋白形成復(fù)合物。在另一洗滌步驟之后，通過(guò)添加顯色底物3,3'，5,5’-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來(lái)分析與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合酶的數(shù)量與被測(cè)樣品中白蛋白的濃度直接相關(guān)；因此，在450 nm處的吸收是對(duì)被測(cè)樣品中白蛋白濃度的測(cè)量。這個(gè)
從校準(zhǔn)器建立的校準(zhǔn)曲線中插入試樣中的白蛋白量，并對(duì)樣品稀釋進(jìn)行校正。

圖1.

1.固相結(jié)合抗白蛋白抗體

2.添加校準(zhǔn)器和樣品

3.形成白蛋白*抗白蛋白復(fù)合物

4.去除未結(jié)合的樣本蛋白質(zhì)

5.添加抗alb-hrp共軛物

5.抗ALB HRP*ALB*抗ALB形成的復(fù)合物

6.去除未結(jié)合的抗ALB HRP

7.添加TMB基板

8.測(cè)定結(jié)合酶活性

組件
1。稀釋濃縮液
一瓶含有50毫升5倍濃縮稀釋劑的緩沖液。
2。濃縮洗滌液
一瓶含有50毫升20倍濃縮洗滌液。
三。酶抗體結(jié)合濃縮物
一小瓶含有150微升100倍濃縮親和力純化的抗大鼠白蛋白抗體，該抗體與HRP在A中結(jié)合。
穩(wěn)定緩沖器。
4。TMB基質(zhì)溶液
一瓶含有12毫升TMB和過(guò)氧化氫的檸檬酸緩沖液，pH3.3。
5。停止解決方案
一瓶含有12毫升0.3米硫酸。
警告：避免接觸皮膚。
6。微量滴定板
12個(gè)可拆卸的8個(gè)井條，位于井架框架內(nèi)。用親和力純化的抗鼠白蛋白包被。
7。大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器
一瓶含有凍干大鼠微量白蛋白校準(zhǔn)器。
8。陽(yáng)性對(duì)照
一瓶含有50升血清和0.1%Sodium azide。濃度見(jiàn)控制證書(shū)。
所需但未提供的材料
•用于制造和分配稀釋液的精密移液管（2μl至200μl）
•試管
•微孔板清洗機(jī)/吸氣機(jī)
•蒸餾水或去離子水
•微型板閱讀器
•用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿
•計(jì)時(shí)器

注意事項(xiàng)
1。開(kāi)始分析前仔細(xì)閱讀說(shuō)明。
2。此套件僅供研究使用。
三。為保證本產(chǎn)品的質(zhì)量和可靠性，我們付出了很大的努力。但是，有可能
在這種情況下，由于干擾因素的高水平，可能會(huì)得到不尋常的結(jié)果。
4。防腐劑
陽(yáng)性對(duì)照品含有0.1%Sodium azide。
5。不需要添加劑或防腐劑來(lái)保持樣品的完整性。避免疊氮污染。
6。濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞抑制酶反應(yīng)。
7。其他注意事項(xiàng)：
不要交換不同批次的套件組件。
請(qǐng)勿在到期日后使用套件組件。
防止試劑受到陽(yáng)光直射。
不要用嘴吸液。
不要在使用試劑的地方吃、喝、吸煙或使用化妝品。
使用手套避免接觸試劑。
停止溶液含有稀硫酸?？赡艽碳ぱ劬推つw。之后用水沖洗