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重組抗體表達(dá)是利用基因重組技術(shù),將抗體序列轉(zhuǎn)入表達(dá)載體并在表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá),終純化得到重組抗體.相較于傳統(tǒng)的抗體制備方法,利用基因重組技術(shù)表達(dá)抗體具有諸多優(yōu)勢(shì)

周期短:重組抗體生產(chǎn)周期為6~8周,而傳統(tǒng)制備方法需4~6個(gè)月;

可控性高:抗體的基因是確定的,因此實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性好且批次間差導(dǎo)小;

免疫原性低:不需要免疫動(dòng)物,抗體不會(huì)產(chǎn)生鼠源性,不容易激起人體的免疫反應(yīng);

基因工程改造:利用基因重組技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)抗體片段的生產(chǎn)以及鼠源單抗的人源化改造。

Anti-diUbiquitin K33 Affimer Reagent – GFP, 7xHis tag

一般  

名稱 Anti-diUbiquitin K33 Affimer Reagent - GFP，7xHis標(biāo)簽

目錄代碼 AVA00105

概觀  

克隆ID K33-1

尺寸（μg） 100

經(jīng)測(cè)試的應(yīng)用程序 Western Blotting

標(biāo)簽 7X他，GFP

共軛 非結(jié)合

屬性  

形成 液體

存儲(chǔ)說明 在4ºC下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。對(duì)于長(zhǎng)期儲(chǔ)存，建議在-20ºC下以單次使用的等分試樣儲(chǔ)存。

緩沖 100mM磷酸鈉，150mM氯化鈉，0.02％Sodium Azide，pH7.4

純度 > 95％

凈化方法 IMAC隨后進(jìn)行脫鹽

克隆 單克隆

目標(biāo)  

目標(biāo) di-Ubiquitin K33

物種反應(yīng)性 人的

目標(biāo)功能 底物蛋白通過遍在蛋白本身（Lys6，Lys11，Lys27，Lys29，Lys33，Lys48和Lys63）上的賴氨酸殘基與遍在蛋白連接。當(dāng)遍在蛋白的賴氨酸殘基與另一遍在蛋白的羧基末端甘氨酸連接時(shí)形成多聚泛蛋白鏈。在特定賴氨酸殘基處多聚化的蛋白質(zhì)顯示出針對(duì)不同過程的趨勢(shì)，從蛋白質(zhì)靶向到蛋白酶體降解，調(diào)節(jié)功能，亞細(xì)胞定位和影響蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用。由于可用的工具有限，K33-多泛素化的確切功能在很大程度上是未知的。

研究領(lǐng)域 UPS

SDS-PAGE和印跡

在非還原條件下，在Bolt 4-12％Bis-Tris Plus凝膠（Thermo Fisher）上分離蛋白質(zhì)樣品（每孔200ng），并使用iBlot2（Thermo Fisher）印跡到硝酸纖維素膜上。

閉塞

使用1x酪蛋白塊（Sigma）在1×TBS（1小時(shí)，RT，輥）中封閉膜

洗1

3×5mL的1×TBS-T（0.05％Tween-20），5分鐘，RT，輥

Affimer孵化

1/1000 in 1 x Casein Block（Sigma）in 1 x TBS（16 h，4°C，roller）

洗2

3×5mL的1×TBS-T（0.05％Tween-20），5分鐘，RT，輥

發(fā)現(xiàn)

1000 x Penta-His HRP（BioRad），1 x酪蛋白嵌段（Sigma），1 x TBS（1小時(shí)，RT°C，滾筒）

洗3

3×5mL的1×TBS-T（0.05％Tween-20），5分鐘，RT，輥

基質(zhì)

ECL（Amersham）

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