mediomics 1-1-1004說明書
Bridge-It® S-Adenosyl Methionine (SAM) Fluorescence Assay Kit, 384-well format
貨號：1-1-1004。類別：384 孔板, Bridge-It 檢測, DNA 甲基化,神經(jīng)科學, SAM。標簽：384 孔，AdoMet，Bridge-It，S-腺苷蛋氨酸，SAM，SAMe。
描述
Bridge-It® S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 熒光檢測試劑盒，384 孔格式
應用：
定量生物體液、細胞培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基以及組織和細胞提取物中的 SAM 水平
表觀遺傳學和甲基化研究
許多神經(jīng)和精神疾病，包括阿爾茨海默病、抑郁癥、艾滋病毒相關的神經(jīng)功能障礙/癡呆、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊髓退化、癲癇、纖維肌痛、偏頭痛，以及慢性肝功能障礙、動脈硬化和癌癥
特征：
簡單： 將測試樣品或標準品與檢測溶液混合并在 ~25°C 下孵育
快速： 孵育 30 分鐘后讀取熒光信號
靈敏： 測定法以 0.5 µM 的檢測下限測量 SAM（即 96 孔中的 50 pmol/孔或 384 孔黑色微孔板中的 20 pmol）
靈活： 檢測適用于低通量和高通量篩選形式
S-腺苷蛋氨酸和 Bridge-It 熒光檢測的背景信息
S-腺苷蛋氨酸
S-腺苷甲硫氨酸（也稱為 SAM、SAMe 或 AdoMet）在所有類型生物體的甲基化生物學過程中發(fā)揮著至關重要的作用。在甲基化循環(huán)中，SAM 充當甲基的供體，用于 DNA 和蛋白質的共價修飾。SAM 水平的變化與衰老過程、許多神經(jīng)和精神疾病有關，包括阿爾茨海默病、抑郁癥、HIV 相關的神經(jīng)功能障礙/癡呆、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊髓退化、癲癇、纖維肌痛、偏頭痛和還有慢性肝功能不全、動脈硬化和癌癥。目前，SAM 使用高壓液相色譜 (HPLC) 方法進行量化。HPLC 耗時、昂貴，而且由于需要大量的有機溶劑，
Bridge-It ® S-腺苷蛋氨酸熒光 (SAM) 檢測1,2
Mediomics Bridge-It ® S-腺苷蛋氨酸 (SAM) 熒光檢測方法基于成熟的熒光測量技術和我們獲得新型檢測平臺設計的結合它利用 DNA 結合蛋白作為它們各自的小分子共調節(jié)因子（配體）的生物傳感器。DNA 序列特異性 MetJ 蛋白對其DNA 結合位點的親和力在其配體 S-腺苷甲硫氨酸的存在下大大增加。對于該測定，MetJ 共有序列被分成兩個 DNA“半位點"。一半片段用熒光素標記，另一半片段用 Oyster ® 645 熒光團標記3,4。測試樣品中 SAM 的相對量將影響測定中 DNA-MetJ 蛋白復合物形成的量。當這種復合物形成時，它會使熒光標記的 DNA 半位點靠近并導致熒光信號發(fā)射發(fā)生可測量的變化（增加），這可以使用酶標儀輕松測量（波長設置：吸收 485 nm；發(fā)射 665 nm ）。然后使用 SAM 標準曲線確定測試樣品中的 SAM 濃度。Bridge-It ® SAM 熒光檢測方法表現(xiàn)出非常理想的性能特征，包括高 (>6:1) 信號與背景 (S/B) 比、寬檢測范圍 (~0.4 µM – 100 µM) 以及 0.4 µM 的檢測靈敏度。該檢測水平 (0.4 µM) 可用于量化大多數(shù)感興趣的測試樣品中的 SAM，包括生物體液、細胞培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基以及組織和細胞的提取物。
與 HPLC 程序相比，Bridge-It ® SAM 熒光檢測方法采用 384 和 96 孔微孔板形式。因此，它非常適合在大量測試樣品中快速、同時測量 SAM 水平。此外，這種方法很容易適應目前用于藥物發(fā)現(xiàn)研究的高通量篩選平臺。
